Elispot Borrelia miyamotoi
Borrelia miyamotoi izolowana jest m.in. z krwi i płynu mózgowo-rdzeniowego osób z objawami neuroboreliozy (zapalenia mózgu, opon mózgowo-rdzeniowych i nerwów czaszkowych), u których występuje sama lub łącznie z Borrelia burgdorferi. Zakażenie Borrelia miyamotoi jest niewykrywalne przy zastosowaniu standardowych metod serologicznych stosowanych w boreliozie (ELISA i Western Blot), ponieważ Borrelia miyamotoi posiada inne antygeny, których nie mają krętki powodujące „klasyczną” boreliozę. W diagnostyce zakażeń Borrelia miyamotoi znalazły zastosowanie testy EliSpot.
Badania realizujemy na miejscu i wysyłkowo.
Elispot - o metodzie
Testy EliSpot to badania oceniające odpowiedź komórkową, które poprzez wykrywanie specyficznych limfocytów T efektorowych, weryfikują aktywność zakażenia.
Badania realizujemy na miejscu i wysyłkowo. Przy badaniach realizowanych wysyłkowo, po zakupieniu badania EliSpot i jego opłaceniu, na podany adres wysyłamy Pacjentowi Mobilny Zestaw EliSpot wraz z instrukcją dla Pacjenta i Personelu Medycznego. Zapoznaj się z instrukcjami:
Instrukcja dla Pacjenta i Instrukcja dla Personelu Medycznego
Elispot Borelia miyamotoi - o badaniu
Borrelia miyamotoi jest patogenem przenoszonym przez kleszcze na terenie półkuli północnej i opisanym stosunkowo niedawno (1995). Zaliczana jest do grupy krętków powodujących gorączki powrotne, przenoszonych przez kleszcze (podobnie jak gatunki Borrelia hermsii, Borrelia parkerii i Borrelia duttonii).
Odsetek zakażonych kleszczy w Polsce i sąsiadujących krajach wynosi kilka procent. Zakażenie przenoszone jest transowarialnie i transstadialnie, a rezerwuarem jest mała i duża zwierzyna leśna (gryzonie, borsuki, jenoty, zającowate, ptaki i zwierzyna płowa). Odsetki serokonwersji wśród mieszkańców Europy (Holandia) wynosiły od 2% (dawcy krwi) do ok. 15% (leśnicy i osoby z boreliozą i/lub anaplazmozą granulocytarną), co dowodzi znacznego ryzyka zakażenia przy kontakcie z kleszczem.
Zakażenie Borrelia miyamotoi łączone jest z występowaniem objawów neurologicznych sugerujących boreliozę, w tym objawów zapalenia mózgu, opon mózgowo-rdzeniowych i zajęcia nerwów czaszkowych. Opisywano jednak również występowanie innych objawów spoza OUN (ośrodkowego układu nerwowego), jak gorączka, dreszcze, zmęczenie, nudności i wymioty oraz bóle mięśniowo-stawowe. W obrazie badań laboratoryjnych może występować leukopenia, trombocytopenia oraz wzrost aktywności transaminaz.
Ze względu na znaczną różnicę filogenetyczną pomiędzy krętkami boreliozy (Borrelia burgdorferi sensu lato) i Borrelia miyamotoi, istnieją duże trudności w diagnostyce zakażeń tym ostatnim patogenem. Jest ono niewykrywalne przy zastosowaniu standardowych metod serologicznych stosowanych w boreliozie (ELISA i Western Blot). Dotychczas zastosowanie w diagnostyce zakażeń Borrelia miyamotoi znalazły metody molekularne (np. PCR i rtPCR) i serologiczne, a także testy EliSpot. Podkreślić jednak należy, że jak dotąd nie opracowano komercyjnie dostępnych serologicznych testów diagnostycznych wykrywających to zakażenie.
Wychodząc naprzeciw potrzebom diagnostycznym Centrum Medyczne Wielkoszyński oferuje test EliSpot wykrywający zakażenia krętkiem Borrelia miyamotoi. Badanie może być szczególnie przydatne u pacjentów z objawami boreliozy i powtarzalnie ujemnymi wynikami testów serologicznych w kierunku zakażenia krętkiem Borrelia burgdorferi s.l. Jak podkreśla się w piśmiennictwie, z zakażeniem lub współzakażeniem (koinfekcja) krętkami z grupy gorączek powrotnych (w tym w szczególności Borrelia miyamotoi) należy liczyć się w przypadkach seronegatywnych neuroinfekcji (objawy sugerujące neuroboreliozę, przy ujemnych wynikach badań w kierunku zakażenia Borrelia burgdorferi s.l.).
Antygenem wykorzystanym do stymulacji limfocytów w teście EliSpot w kierunku zakażenia Borrelia miyamotoi jest swoista dla tego gatunku fosfodiesteraza glicerofosfodiestrowa (antygen GlpQ). Jest to białko niewystępujące u krętków należących do genogrupy Borrelia burgdorferi sensu lato. Stąd wyjątkowa specyficzność testu w wykrywaniu zakażeń powodowanych przez krętki z grupy gorączek powrotnych, w tym zakażenia Borrelia miyamotoi.
Elispot - interpretacja wyników
Za wynik dodatni uważana jest wartość indeksu stymulacji (SI) powyżej 3 (aktywne zakażenie). Indeksy stymulacji w zakresie od 2 do 3 wskazują na możliwość aktywnego zakażenia (wynik graniczny).
| Wyniki testu EliSpot | Wartości indeksów stymulacji (SI) |
| Ujemny | Poniżej 2 |
| Graniczny (wątpliwy) | Od 2 do 3 |
| Dodatni | Powyżej 3 |
W celu weryfikacji stanu funkcjonalnego (żywotności i zdolności do aktywacji) limfocytów pacjenta dla każdego testu EliSpot wykonywane jest badanie z mitogenem, tzw. kontrola dodatnia. Jako mitogen stosowana jest lektyna ze szkarłatki (PWM – Pokeweed mitogen) – związek, który nieswoiście pobudza limfocyty do proliferacji i wydzielania cytokin, m.in. interferonu gamma.
Dla prawidłowej interpretacji każdego testu EliSpot konieczne jest uzyskanie dodatnich wyników w kontroli z mitogenem. Stanowi to dowód na to, że w teście użyto żywych limfocytów, które charakteryzowały się pełną zdolnością do reakcji z antygenami.